{"title":"Fusionsprotein: Infobox I","body":"Fusionsprotein<\/STRONG>
<\/BR>
<\/BR>Die Expression codierender DNA-Sequenzen als Fusionsprotein kann gegenüber der direkten Expression zu einem reinen Genprodukt ohne Trägerprotein verschiedene Vorteile haben:
<\/BR>a) Das Trägerprotein schützt das gewünschte, jedoch oft expressionssystemfremde Protein vor Abbau durch Proteasen<\/A>. So wird als Trägerprotein bei Expression in prokaryotischen Systemen oft ein Anteil der durch das lac<\/I>Z-Gen codierten β-Galactosidase<\/A> verwendet, welche auch natürlicherweise in Bakterien vorkommt.
<\/BR>b) Durch Verwendung einiger besonderer Trägerproteine, wie z.B. der Glutathion-S-Transferase (GST), wird die Löslichkeit von in großen Mengen exprimierten Proteinen in den Wirtszellen erhöht, wodurch eine Präzipitation der Proteine als Einschlußkörper verhindert und die Isolierung erleichtert wird.
<\/BR>c) Das Trägerprotein kann zur Reinigung von Fusionsproteinen durch Affinitätschromatographie<\/A> benutzt werden, z.B. mittels spezifischer Antikörper gegen das Trägerprotein oder für das Trägerprotein spezifischer Liganden. Wird z.B. das prokaryotische Maltose-bindende Protein (MBP, codiert durch das Gen mal<\/I>E) als Träger eingesetzt, so können die mit diesem System erhaltenen Fusionsproteine direkt über eine Maltose-Säule affinitätschromatographisch gereinigt werden. Den Vorteil einer effektiven Reinigung durch Affinitätschromatographie<\/A> oder Ionen-Austauschchromatographie<\/A> bieten auch Fusionsproteine mit endständigen Tags.
<\/BR>d) Bei Einsatz bestimmter Expressionsvektoren und Trägerproteine können in einigen Fällen die nach Reinigung in quantitativem Maßstab erhaltenen Fusionsproteine durch bestimmte Enzyme spezifisch geschnitten und in Trägerprotein und reines Zielprotein getrennt werden. Befindet sich z.B. im Anschluß an das Trägerprotein ein Peptidlinker mit Aminosäuren<\/A>, die die Erkennungssequenz für den hochspezifischen Faktor Xa<\/SUB> der Blutgerinnungskaskade (Blutgerinnung<\/A>, Tab.) umfassen, so können Trägerprotein und Zielprotein nach Spaltung des Fusionsprodukts getrennt gereinigt werden."}