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Lexikon der Biochemie: Dot-Blotting

Dot-Blotting, eine einfach zu handhabende Filterhybridisierungs-Technik. Die zu analysierende DNA oder RNA wird ohne vorangegangene gelelektrophoretische Fraktionierung direkt auf Membranen gegeben. Hierzu verwendet man einfache Apparaturen, die ein Gitter enthalten, und die zu testende Probe wird über Vakuum auf die unterhalb des Gitters befindliche Membran gesaugt. Man kann viele Proben gleichzeitig testen und quantifizieren. Mittels dieser Methode kann beispielsweise die Menge einer bestimmten Nucleinsäure innerhalb eines Nucleinsäuregemisches quantitativ bestimmt werden, oder es lassen sich viele Proben hinsichtlich der Präsenz einer bestimmten Oligo- oder Polynucleotidsequenz analysieren. Doppelsträngige DNA-Proben müssen denaturiert werden, weil nur vollständig denaturierte DNA bei der sich anschließenden Hybridisierung ein verlässliches Signal gibt.

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