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Lexikon der Biologie: Affinitätschromatographie

Affinitätschromatographie w [von Affinität, Chromatographie], spezielle Form der Adsorptionschromatographie, bei der das Adsorbens (Adsorption) künstlich eingeführte Gruppen mit hoher Affinität und daher hoher Bindestärke zu den abzutrennenden Stoffen besitzt, so daß diese bevorzugt adsorbiert und so von anderen Stoffen abgetrennt werden können. Meist ist das Adsorbens Agarose (Agar), an die durch entsprechende chemische Behandlung verschiedene Liganden, wie Proteine, Enzyme, Antikörper, Lectine, Hormone oder Nucleinsäuren, gekoppelt werden. Die Gewinnung des entsprechenden Bindungspartners erfolgt durch: a) Bindung von Ligand und Bindungspartner unter geeigneten Bedingungen, b) Auswaschen nichtbindender Substanzen, c) Trennen des Bindungspartners vom Liganden durch Bedingungen, die eine Bindung der beiden Moleküle nicht mehr erlauben, z. B. Veränderung des pH-Wertes oder der Ionenstärke der Pufferlösung (Puffer). Anwendung findet die Affinitätschromatographie unter anderem bei der Gewinnung von Antikörpern (monoklonale Antikörper, Protein A, Protein G), der Isolierung von Rezeptormolekülen der Zelloberfläche (Rezeptoren, Membran) und der Identifizierung DNA-bindender Proteine (Protein-DNA-Interaktion, Histone). Chlortriazinfarben, Chromatographie.

R.We.

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