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Lexikon der Biologie: cDNA

cDNA, c-DNA, copy-DNA, komplementäre DNA, zu RNA (Ribonucleinsäuren) komplementäre (Komplementarität) einzelsträngige DNA (von engl. complementary DNA); bildet sich mit RNA als Matrize unter der Wirkung des Enzyms reverse Transkriptase in Gegenwart der vier 2´-Desoxyribonucleosid-5´-triphosphate (dATP, dCTP, dGTP und dTTP) als Substrate und einem primer Oligonucleotid, das komplementär zum 3´-terminalen Bereich der betreffenden RNA ist (vgl. Abb.). Da eukaryotische mRNA am 3´-Ende poly(A)-Sequenzen (poly(A)-Signale) aufweist, eignet sich zu deren cDNA-Synthese Oligo-dT. Die Nucleotidsequenz von cDNA ist eine exakte "Ablichtung" (eine Art Negativbild) der betreffenden RNA bzw. von deren Teilbereichen, sofern die reverse Transkription nicht die ganze RNA umfaßt. cDNA ist daher, nachdem sie zu doppelsträngiger cDNA (Doppelstrang) ergänzt ist (was mit DNA-Polymerase oder auch im "Eintopfverfahren" mit reverser Transkriptase möglich ist), identisch mit dem Strukturgen, von dem sich die betreffende RNA ableitet. Sie enthält jedoch im Gegensatz zu sog. genomischer DNA (Desoxyribonucleinsäuren) nicht die flankierenden Genbereiche und deren Signalstrukturen und nicht die den intervenierenden Sequenzen (Intron) von Mosaikgenen (Genmosaikstruktur) entsprechenden Bereiche (Intron-Sequenzen). Trotz dieser Einschränkungen ist die Synthese von cDNA mit Hilfe angereicherter mRNA von kaum zu überschätzender Bedeutung für die moderne Gentechnologie, da sie in der Regel den ersten Schritt zur Klonierung Protein codierender Gene (Gen) darstellt. Expressionsbibliothek, Genbibliothek, subtraktive cDNA-Bibliothek.




cDNA

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