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Lexikon der Biologie: ELISA

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ELISA, Abk. für enzyme linked immunosorbent assay, ELISA-Test, eine Methode zur Bestimmung der Konzentration von Antigenen oder Antikörpern (vgl. Abb. ). Einer der miteinander reagierenden Stoffe ist dabei mit einem Enzym markiert, das einen kolorimetrischen Nachweis (Kolorimetrie) erlaubt (üblicherweise alkalische Phosphatase oder Peroxidase).

Die zu untersuchende Substanz (z.B. ein Antigen) wird zunächst an einem festen Träger konzentriert, an den vorher ihr spezifischer Reaktionspartner (z.B. ein Antikörper) gekoppelt wurde. Danach wird die markierte Substanz (in diesem Fall ein zweiter Antikörper mit Spezifität für das Antigen) dazugegeben, die den Farbnachweis erlaubt.

ELISA-Test
Abb. | Der ELISA ist ein oft (vor allem in Reihentests) angewandter Immunassay, mit dessen Hilfe die Konzentration eines Antikörpers bzw. Antigens in einer Lösung (z.B. Serum, Zellkulturüberstand) bestimmt werden kann. Beispiel für einen ELISA:
  1. Bindung des spezifischen Antigens an einen festen Träger (in der Regel Plastikschale); waschen.
  2. Zugabe der zu testenden Lösung (z.B. Humanserum). Ist ein Antikörper mit Spezifität für das Antigen vorhanden, so bindet er an das Antigen; waschen.
  3. Zugabe von Antikörpern, die eine Spezifität für die gebundenen Antikörper haben und an die ein Enzym gekoppelt ist (z.B. mit Peroxidase gekoppelte Anti-Human-IgG-Antikörper); waschen.
  4. Zugabe eines Substrats für das Enzym (kolorimetrischer Nachweis); die Konzentration (Intensität) des entstehenden Farbstoffs läßt Rückschlüsse auf die ursprüngliche Konzentration des gesuchten Antikörpers in der untersuchten Lösung zu.

Eine ähnliche Methode ist der Radioimmunassay (Abk. RIA), bei dem die Detektion des Nachweisreagens mittels radioaktiver Strahlung (Radioaktivität) erfolgt. Agardiffusionstest, ELISPOT-Test, Festphasen-Immunassay, Immunassays, Sandwich-ELISA.

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