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Lexikon der Biologie: Fluorimeter

Fluorimeter s, Meßgerät, das in der Biologie und Medizin über die Messung der Fluoreszenz (Fluorimetrie) vor allem zur Konzentrationsbestimmung von fluoreszierenden Substanzen verwendet wird ( vgl. Abb. ). Von einer Strahlungsquelle (Quecksilber- oder Xenon-Lampe) wird kurzwelliges oder ultraviolettes Licht abgegeben (Primärstrahlung). Mittels Linsen und Blenden wird ein aus parallelen Strahlen bestehendes Lichtbündel hergestellt. Durch Filter bzw. Monochromatoren kann das Spektrum des auf die Meßlösung (Analysenlösung) einfallenden Lichts auf einen begrenzten Wellenlängenbereich reduziert werden. Die Atome oder Moleküle in der Probenlösung absorbieren einen Teil der Anregungsstrahlung (Anregung) und gehen in einen angeregten Zustand über. Beim Übertritt in den Grundzustand emittieren diese Moleküle Licht einer charakteristischen Wellenlänge (Sekundärstrahlung). Unter optimalen Meßbedingungen ist die Intensität der emittierten Strahlung der Konzentration des gelösten Stoffs proportional. Ein Teil der Anregungsstrahlung geht ungehindert (ohne Absorption) durch die Meßprobe hindurch. Die Sekundärstrahlung wird über einen Kondensor zu einem aus parallelen Strahlen bestehenden Lichtbündel vereinigt. Filter oder Monochromatoren bewirken, daß nur Licht der für die Fluoreszenz der gesuchten Substanz charakteristischen Wellenlänge auf den Strahlungsempfänger fällt. In einer Meßwertanzeige kann schließlich die Intensität des emittierten Lichts abgelesen werden, und anhand einer Eichkurve (Eichgerade), die mit Hilfe von Eichstandards (z.B. Eichproteine) erstellt wurde, läßt sich die Konzentration der gesuchten Substanz genau bestimmen. Der Nullpunkt der Messung wird durch die Eigenfluoreszenz des Lösungsmittels festgelegt.



Fluorimeter

Schematische Darstellung eines Fluorimeters.
B Blende, F/M Filter oder Monochromator, G Galvanometer mit Meßwertanzeige, K Küvette mit Analysenlösung, O Optik, Se Strahlungsempfänger, Sq Strahlungsquelle

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