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Lexikon der Biologie: fraktionierte Zentrifugation

fraktionierte Zentrifugation w, korrekter: fraktionierende Zentrifugation, durch differentielle Zentrifugation und Dichtegradienten-Zentrifugation kombinierte Verfahren zur Fraktionierung (fraktionieren) von Zellbestandteilen ( vgl. Abb. ). Claude (A.), Zellfraktionierung, Zellaufschluß.



fraktionierte Zentrifugation

Vor Beginn der Zellfraktionierung wird ein Zellhomogenat in einem geeigneten Puffer, der u.a. die osmotischen Verhältnisse im Zellbrei aufrechterhält, hergestellt. Anschließend werden die Organellen getrennt, wobei ihre meist geringen Gewichts- bzw. Dichteunterschiede zur Auftrennung führen. Selbst große Moleküle können bei den heute erreichbaren hohen Rotationsgeschwindigkeiten und entsprechenden Zentrifugalkräften (bis zu etwa 500.000 g, 1 g

Erdschwerkraft) aussedimentiert werden (differentielle Zentrifugation). Eine noch feinere Auftrennung gestattet die Dichtegradienten-Zentrifugation. Man schichtet dazu im Zentrifugenglas Saccharoselösung abnehmender Konzentration und damit Dichte vorsichtig übereinander und erhält so einen Dichtegradienten. Zuoberst kommt die zu trennende Probe. Bei hochtourigem Zentrifugieren sammeln sich die Zellpartikel in den Bereichen des Dichtegradienten, die ihrer eigenen Dichte entsprechen. Zentrifugalkräfte und Reibungskräfte heben sich an diesen Stellen auf.

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