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Lexikon der Biologie: HAT-Medium

HAT-Medium, Selektionsmedium, das üblicherweise angewandt wird, um nach einer Zellfusion, wie sie z.B. bei der Herstellung von Hybridomen durchgeführt wird, für tatsächlich fusionierte Zellen zu selektionieren (HAT-Selektion, Abb.). Es enthält Hypoxanthin, Aminopterin und Thymidin. Bei der Herstellung von Hybridomen werden Milzzellen mit Myelomzellen fusioniert. Da nicht fusionierte Milzzellen ohnehin nach einigen Tagen absterben, braucht gegen sie nicht selektioniert zu werden. Nicht fusionierte Myelomzellen werden durch den Folsäure-Antagonisten Aminopterin vergiftet, der die de-novo-Synthese von Nucleinsäure verhindert. Ein zweiter Syntheseweg für Nucleinsäuren fehlt den Myelomzellen, wird aber durch die Milzzellen mit in die Fusion eingebracht, so daß die Myelom-Milzzell-Hybride von den Milzzellen die Resistenz gegen Aminopterin erben, von der Myelomzelle deren unbegrenztes Wachstum. Hypoxanthin und Thymidin werden für den alternativen Syntheseweg (salvage pathway) benötigt.

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