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Lexikon der Biologie: ligase chain reaction

ligase chain reaction, Ligase-Kettenreaktion, Abk. LCR, eine neue Amplifikationsmethode, mit der man nicht nur DNA amplifizieren, sondern auch gezielt Allel-spezifische Punktmutationen nachweisen kann. Für die LCR benötigt man eine thermostabile Ligase (Ligasen) und 4 primer, die optimal zu der Sequenz in der Nachbarschaft der Mutation passen. Die verwendete thermostabile Ligase verbindet 2 benachbarte Oligonucleotide nur dann, wenn diese an der Verbindungsstelle absolut komplementär zur Zielsequenz sind ( vgl. Abb. ). Im nächsten Zyklus bindet ein zweites primer-Set an die zuvor ligierten Oligonucleotide. Die LCR stellt eine schnelle Methode in der klinischen DNA-Diagnostik dar.



ligase chain reaction

a DNA-Denaturierung bei 94 C; bei 65 C binden die 4 primer in der Nachbarschaft der Punktmutation; b thermostabile Ligase ligiert die Oligonucleotide bei 65 C; c Wiederholung der Zyklen

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