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Lexikon der Biologie: limiting dilution analysis

limiting dilution analysis w, Grenzwert-Verdünnung, Methode, um die Frequenz von Zellen mit einer bestimmten Spezifität und Funktion in einer Population zu bestimmen. Die zu untersuchenden Zellen (z.B. B-Lymphocyten) werden dabei in einer Verdünnungsreihe ausplattiert, d.h., ihre Zahl wird ab einer bestimmten niedrigen Konzentration limitierend für die untersuchte Reaktion (z.B. die Produktion von Antikörpern). Die anderen an der Reaktion beteiligten Zellen (Antigen-präsentierende Zellen, T-Lymphocyten) müssen dabei allerdings in höherer, also nicht limitierender Konzentration in der Kultur vorhanden sein. Die Auswertung der limiting dilution analysis erfolgt, indem aus der Anzahl der nicht „antwortenden" Kulturen (im beschriebenen Fall derjenigen Kulturen, die keine Antikörper produzieren) nach der Poisson-Verteilung die Frequenz der B-Lymphocyten in der Ausgangspopulation bestimmt wird. Voraussetzung ist allerdings, daß die Reaktion einer einzelnen Zelle in der limiting dilution analysis noch nachgewiesen werden kann. Immunassays.

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