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Lexikon der Biologie: pBR322

pBR322, einer der ersten in der Gentechnologie verwendeten und künstlich hergestellten Klonierungvektoren. pBR322 setzt sich aus 3 ausgewählten unterschiedlichen DNA-Abschnitten natürlich vorkommender Plasmide zusammen ( vgl. Abb. ), die durch gentechnologische Verfahren kombiniert wurden. Der Vektor besitzt alle für Klonierungsvektoren nötigen Charakteristika, z.B. einen prokaryotischen Replikationsursprung (origin of replication), Antibiotika-Resistenzgene (Antibiotika-Resistenz) als Marker und singuläre Schnittstellen für die Insertion von Fremd-DNA. Die Sequenz der 4636 bp langen pBR322-DNA ist ermittelt worden. Neben der Verwendung als Standardklonierungsvektor wird pBR322 auch als Modellsystem für Untersuchungen zur Physiologie von Plasmiden, z.B. zur Untersuchung der Stabilität von Plasmiden und Regulation ihrer Kopienzahl (die "copy number" von pBR322 liegt bei ca. 20 Kopien pro Zelle), zur DNA-Topologie und Replikation herangezogen. Inzwischen sind sehr viele Abkömmlinge des pBR322 hergestellt worden, die zum Teil sehr anwendungsspezifische Eigenschaften aufweisen und gleichzeitig einige Nachteile dieses Vektors nicht mehr besitzen, wie z.B. eine gewisse Instabilität in Zellen, die relativ geringe Kopienzahl oder die Möglichkeit der unerwünschten Weitergabe des Plasmids an andere Bakterienzellen (Konjugation). Col-Faktor, Polylinker, Plasmid-Amplifikation.



pBR322

Karte des Plasmids pBR322. Eingetragen sind die Resistenzen gegen Ampicillin (Gen bla, für eine β-Lactamase codierend) und Tetracyclin (Gen tet) vermittelnde Gene sowie einige Erkennungsstellen für Restriktionsenzyme und der Bereich des Replikationsursprungs (ori). Außerdem ist angegeben, welchen natürlich vorkommenden Plasmiden bestimmte Bereiche entstammen.

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