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Lexikon der Biologie: Reticulocytenlysat

Reticulocytenlysat s, Kaninchen-Reticulocytenlysat, Abk. RRL (von engl. rabbit reticulocyte lysate), häufig verwendetes in-vitro-Translationssystem, das aus Kaninchen-Reticulocyten gewonnen wird. Dazu wird den Kaninchen einige Tage vor der Blutentnahme mehrfach ein anämisierendes Agens (z.B. Acetylphenylhydrazin) injiziert, so daß zum Zeitpunkt der Blutentnahme wegen der gesteigerten Aktivität des erythropoetischen Systems (Erythropoese) eine erhöhte Reticulocytenzahl im Blut enthalten ist. Die Reticulocyten werden durch Zentrifugation aus dem Blut angereichert und in destilliertem Wasser lysiert. Nach Abbau endogener mRNAs (messenger-RNA) durch Ca2+-abhängige Micrococcus-Endonuclease (Micrococcus-Nuclease), die anschließend durch Chelierung von Ca2+ mittels EGTA oder EDTA (Ethylendiamintetraacetat) wieder inaktiviert wird, kann mit Zugabe der gewünschten mRNA die in-vitro-Translation erfolgen.

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