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Lexikon der Biologie: reverse Genetik

reverse Genetik w, reverse genetics, Bezeichnung für alle molekularbiologischen und gentechnologischen Verfahren (Gentechnologie), bei denen die normale Reihenfolge genetischer Analysen umgekehrt ist. Normalerweise führt die Analyse von vorhandenen Mutanten für ein bestimmtes Merkmal, z.B. Ausfall oder Veränderung eines Genprodukts oder die Information über biochemische Defekte, auf die eine Krankheit zurückgeht, zur Identifikation von Genen (vom Phänotyp zum Genotyp). Die Grundlage der Genisolierung ist also die Funktion des Gens oder des Genprodukts (functional cloning). Bei der reversen Genetik wird ein unbekanntes Gen auf einem Chromosom oder DNA-Abschnitt identifiziert. Dies ist z.B. durch chromosome walking, RFLP-Analysen (RFLP) oder Gensuche in Genbibliotheken mit heterologen Sonden (Gensonde) möglich. Durch weitere Untersuchungen wird dann versucht, die Funktion dieses Gens zu bestimmen. Hierzu werden Sequenzvergleiche mit bekannten Genen durchgeführt oder das betreffende Gen durch in-vitro-Mutagenese verändert (z.B. site-directed mutagenesis bestimmter Sequenzmotive) und in mutierter Form in geeignete Zellen zurückgeführt. Das Verhalten und die Auswirkungen des geänderten Genprodukts können dann analysiert werden (vom [veränderten] Genotyp zum [neuen] Phänotyp). Hier ist die Grundlage der Genisolierung also die Position des gesuchten Gens im Genom. Die Information über den Genort steht im Mittelpunkt, die Isolierung des Transkripts erfolgt aufgrund der Kartierungsdaten im Genom. Die ursprüngliche Bezeichnung dieser Vorgehensweise (reverse genetics) wird heute durch die Bezeichnung positional cloning ersetzt, die den eigentlichen Ansatz, von der Position im Genom ausgehend über ein Transkript zur Proteininformation, genauer widerspiegelt.

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