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Lexikon der Biologie: Shift-Western-Technik

Shift-Western-Technik, eine Erweiterung der band-shift-Technik (band shift) zur Analyse von Protein-DNA-Interaktionen. Mit der Shift-Western-Technik kann unter günstigen Umständen untersucht werden, welche Proteine im einzelnen an den beobachteten Protein-DNA-Interaktionen beteiligt sind. Im Rahmen der Shift-Western-Technik wird zunächst ein übliches band-shift-Experiment mit Proteinen und DNA (Desoxyribonucleinsäuren) durchgeführt. Es werden die Protein-DNA-Komplexe und freie DNA auf einem Polyacrylamidgel (Polyacrylamid-Gelelektrophorese) aufgetrennt. Danach wird mit dem erhaltenen Gel wie bei der Western-Technik (blotting-Techniken) ein Transfer der aufgetrennten Komponenten auf eine Trägermembran durchgeführt. Die so erhaltene Membran kann nun für immunologische Nachweise von Proteinen wie bei der Western-Technik eingesetzt werden, wenn spezifische Antikörper gegen bestimmte Proteine verfügbar sind. Hierdurch kann insbesondere bei einem Auftreten mehrerer Protein-DNA-Komplexe gezeigt werden, welcher der Komplexe durch ein bestimmtes Protein (mit)verursacht wurde. Dies ist besonders für die Fälle von Protein-DNA-Interaktionen interessant, bei denen verschiedene Proteine mit der gleichen DNA-Sequenz (z.B. als Heterodimere oder Heteromultimere) interagieren.

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