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Lexikon der Biologie: Silberfärbung

Silberfärbung, Sichtbarmachung von Proteinen und (seltener) Nucleinsäuren nach elektrophoretischer Auftrennung in Polyacrylamidgelen (in Agarosegelen zu hohe Hintergrundfärbung). Die Silberfärbung von Proteinen ist deutlich empfindlicher (Nachweisgrenze im Subnanogramm-Bereich) als die Färbung mit Coomassie-Brillantblau. Proteine werden mit Trichloressigsäure (Fällung) im Gel fixiert und danach in einer Silbernitratlösung (Silbernitrat) inkubiert. Durch funktionelle Gruppen der Proteine werden Silberionen gebunden und reduziert (Reduktion), wodurch sich Silberkeime bilden. Mittels starker Reduktionsmittel werden verstärkt Silberionen zu metallischem Silber reduziert, was nahe der bereits gebildeten Silberkeime, also an den Proteinbanden im Gel, weitaus schneller als im übrigen Gel geschieht. Durch eine massive Änderung des pH-Werts, z.B. durch Zugabe von Essigsäure oder Glycinlösung (Glycin), kann dieser Vorgang gestoppt werden.

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