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Lexikon der Biologie: sticky ends

sticky ends, cohesive ends, klebrige Enden, kohäsive Enden, entstehen nach der Spaltung von DNA durch Restriktionsenzyme, welche die beiden Stränge der Doppelhelix an zueinander versetzten Stellen schneiden. Man findet hierbei kurze einzelsträngige Bereiche an den Enden der DNA-Fragmente, die je nach Art des verwendeten Enzyms als 5'-überhängende oder 3'-überhängende Basen vorliegen ( vgl. Abb. ). Im Gegensatz dazu liefern Restriktionsenzyme, die den DNA-Doppelstrang an sich gegenüberliegenden Stellen schneiden, sog. glatte Enden (blunt end). Klebrige Enden sind in vielen Fällen für die Ligation von DNA-Fragmenten besonders günstig, wenn die überhängenden Basen zueinander komplementär (Komplementarität) sind. Die Ligation von zueinander passenden sticky ends ist ca. 1000mal effektiver als die Ligation von blunt ends. Liegen jedoch überhängende Basen vor, die nicht miteinander paaren können, so müssen die Enden dieser Fragmente vor einer Ligation mit dem Klenow-Fragment der DNA-Polymerase stumpf gemacht werden. DNA-Fragmente mit 5'-überhängenden Enden können für die Markierung von DNA benutzt werden, indem durch Klenow-Polymerase α32P-Nucleosidtriphosphate an den Enden eingebaut werden (Endmarkierung von DNA-Fragmenten). Hierbei dient der 5'-Überhang des komplementären Strangs als Matrize. Natürlich vorkommende klebrige Enden finden sich z.B. in den cos-sites des Lambda-Phagen und werden in den Cosmiden eingesetzt. Berg (P.); Gentechnologie .



sticky ends

Restriktionsenzyme können unterschiedlich überhängende oder glatte Enden durch den Schnitt eines DNA-Doppelstrangs generieren.

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