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Lexikon der Biologie: Subklonierung

Subklonierung w [von *sub- , Klonierung], Bezeichnung für Verfahren, durch die bereits bekannte und klonierte, jedoch sehr lange und schlecht handhabbare DNA-Bereiche in kleinere Fragmente (Subfragmente) zerlegt und wieder in oft gleichen oder ähnlichen Vektoren kloniert werden. So werden z.B. große DNA-Bereiche aus dem Genom eines Organismus zunächst in YAC-Vektoren (Hefevektoren), Cosmide oder Phagen-Vektoren (die meist auf dem Lambda-Phagen basieren) kloniert. Dann werden die interessierenden Bereiche durch ausgewählte Restriktionsenzyme in kleinere Fragmente zerlegt und in Plasmid-Vektoren (Plasmide) einkloniert. Sind die so erhaltenen DNA-Abschnitte für weitere Analysen immer noch zu groß, können weitere Subfragmente erzeugt und kloniert werden. Dienen die subklonierten Fragmente der Sequenzierung, können die erhaltenen Sequenzdaten kombiniert werden, um die komplette Sequenz des gesamten ursprünglichen DNA-Bereichs zu erhalten. Subklonierungen sind z.B. essentiell für die Analyse von aus genomischen Genbibliotheken isolierten Klonen.

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