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Lexikon der Biologie: subtraktive cDNA-Bibliothek

subtraktive cDNA-Bibliothek, subtraktive cDNA-Genbank, besteht aus cDNAs, die spezifisch für einen von zwei untersuchten Zell- bzw. Gewebetypen sind. Die für einen der beiden zell-(Gewebe-)typen spezifische cDNA-Bibliothek entsteht durch sog. subtraktive Hybridisierung (Subtraktionshybridisierung): cDNA eines Zell-(Gewebe-)typs (I) wird mit einem Überschuß mRNA eines zweiten Zell-(Gewebe-)typs (II) hybridisiert (Hybridisierung). Über eine Hydroxylapatit-Säule (Hydroxylapatit) werden doppelsträngige cDNA/mRNA-Hybride von nicht hybridisierender cDNA bzw. überschüssiger mRNA getrennt. Aus der einzelsträngigen Fraktion kann nach alkalischer Zerstörung der mRNA die für Zell- bzw. Gewebetyp (I) spezifische cDNA zum Doppelstrang aufgefüllt und kloniert werden. Auf diese Weise konnte durch subtraktive Hybridisierung von cDNA aus T-Lymphocyten mit mRNA aus B-Lymphozyten cDNA für T-Zell-Rezeptor angereichert werden. Expressionsbibliothek, Genbibliothek.

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