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Lexikon der Neurowissenschaft: ELISA

ELISA, Abk. für E enzyme linked immunosorbent assay, ein oft (vor allem in Reihentests) angewandter Immunassay, mit dessen Hilfe die Konzentration eines Antikörpers bzw. Antigens in einer Lösung (z.B. Serum, Zellkulturüberstand) bestimmt werden kann ( siehe Abb. ). Einer der miteinander reagierenden Stoffe ist dabei mit einem Enzym markiert, das einen kolorimetrischen Nachweis erlaubt (üblicherweise alkalische Phosphatase oder Peroxidase). Die zu untersuchende Substanz (z.B. ein Antikörper) wird zunächst an einem festen Träger konzentriert, an den vorher ihr spezifischer Reaktionspartner (z.B. ein Antigen) gekoppelt wurde. Danach wird die markierte Substanz (z.B. ein zweiter Antikörper mit Spezifität für den ersten Antikörper) dazugegeben, die den Farbnachweis erlaubt. Eine ähnliche Methode ist der Radioimmunassay (Abk. RIA), bei dem die Markierung des Nachweisreagens durch radioaktive Strahlung erfolgt.



ELISA

Beispiel für einen ELISA:

1 Bindung des spezifischen Antigens an einen festen Träger (in der Regel Plastikschale); waschen.
2 Zugabe der zu testenden Lösung. Ist ein Antikörper mit Spezifität für das Antigen vorhanden, so bindet er an das Antigen; waschen.
3 Zugabe von Antikörpern, die eine Spezifität für die gebundenen Antikörper haben und an die ein Enzym gekoppelt ist; waschen.
4 Zugabe eines Substrats für das Enzym (kolorimetrischer Nachweis); die Konzentration (Intensität) des entstehenden Farbstoffs läßt Rückschlüsse auf die ursprüngliche Konzentration des gesuchten Antikörpers in der untersuchten Lösung zu.

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