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Lexikon der Neurowissenschaft: GFP

GFP, Abk. für grünfluoreszierendes Protein bzw. E green fluorescent protein, ein aus der pazifischen Qualle Aequorea victoria isoliertes Protein, das unter Anregung mit längerwelligem UV-Licht intensive grüne Fluoreszenz zeigt (Fluoreszenzfärbung). GFP zeigt auch bei der rekombinanten Expression in eukaryotischen oder bakteriellen Wirtszellen in Abwesenheit exogener Substrate und Cofaktoren intensive, direkt sichtbare Fluoreszenz, wodurch es als biologische Sonde zur Untersuchung der Genexpression sowie der Lokalisierung von Proteinen in lebenden Zellen verwendet werden kann. Durch Protein-Engineering wurden effizientere GFP-Mutanten entwickelt, die auch mit dem Untersuchungsprotein fusioniert direkt durch Fluoreszenzmikroskopie (Fluoreszenzmikroskop) in vivo nachweisbar sind und damit das Methodenarsenal der Molekularbiologie innovativ bereichern.

Inzwischen gibt es eine ganze Reihe von Varianten des GFP, wobei etwa die sog. codon usage an den jeweiligen Zielorganismus angepaßt ist oder die spektralen Eigenschaften verschoben sind. So wurde durch Mutation des Tyr66 (Tyrosin) zu Histidin eine blauverschobene Variante erzeugt (BFP, blaufluoreszierendes Protein), so daß auch Doppelmarkierungen möglich sind oder die Wechselwirkung von Proteinen mit Hilfe von Resonanzenergietransfer nachweisbar ist (Immunfluoreszenz).

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