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Lexikon der Biologie: ClB-Methode

ClB-Methode, Methode zur quantitativen Erfassung rezessiver Mutationen in den X-Chromosomen der Gameten von Drosophila-Männchen (Drosophila melanogaster) unter Benutzung sog. ClB-Drosophila-Weibchen, die neben einem normalen X-Chromosom ein dreifach genetisch markiertes X-Chromosom (Marker) besitzen ( vgl. Abb. ). C: eine dominante Markierung (ausgedehnte Inversion), die Crossing over mit dem homologen Chromosom verhindert; l: ein rezessives Letalallel, das sich heterozygot phänotypisch nicht ausprägt; B: die Bar-Mutation (schmale Augen; Bar-Mutanten), die zur phänotypischen Erkennung des markierten Chromosoms führt. Das ClB-Weibchen wird mit dem Männchen gekreuzt, welches das zu testende X-Chromosom besitzt. Tritt in diesem väterlichen X-Chromosom eine rezessive Mutation auf, so wird ein Weibchen der F1-Generation (Filialgeneration) diese genotypisch tragen. Besitzt dieses Weibchen als zweites X-Chromosom das ClB-Chromosom, so ist es phänotypisch an den Bar-Augen zu erkennen. Durch die C-Markierung auf dem ClB-Chromosom ist gewährleistet, daß kein Crossing over bei der Meiose vor der Gametenbildung stattfindet und unveränderte Kopien des zu testenden X-Chromosoms an die Hälfte der F2-Generation weitergegeben werden. Männliche ClB-Individuen der F2-Generation sterben ab. Sämtliche überlebenden F2-Männchen tragen daher das zu testende X-Chromosom und prägen eventuell auf diesem enthaltene Mutationen phänotypisch aus. Letalmutationen verhindern das Auftreten von F2-Männchen, subletale Mutationen verringern lediglich die Fertilität und somit den Anteil der Männchen in F2 auf weniger als 1/3. Bei isolierter Eiablage von vielen ClB-Weibchen der F1-Generation lassen sich somit die Häufigkeiten von letalen und nichtletalen rezessiven Mutationen in den X-Chromosomen der männlichen Elterngameten bestimmen.




ClB-Methode

Schema der ClB-Methode:
a Kreuzung des ClB-Weibchens (♀) mit dem Männchen (♂), welches das zu testende X-Chromosom (dunkel) besitzt. b Die Weibchen mit Bar-Augen (*) werden mit normalen Männchen weitergekreuzt und dann zur Eiablage isoliert. Die Männchen ({) schlüpfen nicht, da dem Letalfaktor l kein l+ gegenübersteht. c Die überlebenden F2-Männchen (**) tragen das zu testende X-Chromosom.
Copyright 1999 Spektrum Akademischer Verlag, Heidelberg

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