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Lexikon der Biologie: Gelfiltration

Gelfiltration w, Ausschlußchromatographie, Gelchromatographie, Permeationschromatographie, Molekularsieb, eine Variante der Chromatographie, bei der Moleküle nach ihrer Größe und Form auf schonende Art getrennt werden, so daß diese Methode auch sehr gut für die Trennung empfindlicher Biomoleküle geeignet ist. Grundlage einer solchen Gelfiltration ist eine mit einer speziellen Gelmatrix gefüllte Säule. Bei dieser Matrix, die mit einem Lösungsmittel im Gleichgewicht steht, handelt es sich in der Regel um ein dreidimensionales Netzwerk aus polymeren organischen Verbindungen (z.B. Dextran, Agarose [Agar], Polyacrylamid), das mit hydrophilen Poren durchsetzt ist. Große Moleküle vermögen eine solche Säule schneller zu durchwandern, da sie schlechter in die Poren der Gelmatrix eindringen können als kleinere Moleküle, welche effektiv in einem größeren Volumen verteilt sind und daher langsamer durch die Matrix gelangen ( vgl. Abb. ). Je kleiner ein Molekül also ist, desto größer ist sein Elutionsvolumen. Das Elutionsvolumen einer Molekülspezies entspricht dem Volumen Lösungsmittel, das nötig ist, um diese Moleküle von der Säule zu eluieren. Durch Vergleich des Elutionsvolumens mit dem von Molekülen bekannter Größe läßt sich die Größe einer unbekannten Molekülspezies bzw. deren relative Molekülmasse abschätzen. Daneben findet die Gelfiltration Anwendung zur Trennung und Reinigung von Makromolekülen (z.B. Proteinen, Polysacchariden, Nucleinsäuren, Hormonen, Antikörpern), zur Konzentrierung und zum Entsalzen von Lösungen oder zur Analyse reversibler Proteinbindungen. FPLC.



Gelfiltration

Separation (Trennung) von kleinen und großen Molekülen (durch Punkte bzw. schwarze Ovale symbolisiert) mit der Gelfiltrations-Chromatographie

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