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Lexikon der Biologie: FACS

FACS, 1) Abk. für Facial Action Coding System. 2) Abk. für fluorescence activated cell sorter (fluoreszenzaktivierter Zellsorter), Apparat zur Analyse und Auftrennung von Zellsuspensionen in Populationen, die sich aufgrund der Licht-Brechung oder aufgrund bestimmter Oberflächenmoleküle unterscheiden ( vgl. Abb. ). Diese Oberflächenmoleküle werden mit Hilfe eines monoklonalen Antikörpers erkannt, der seinerseits mit einem fluoreszierenden Farbstoff (Fluoreszenz, Fluoreszenzmikroskopie) markiert ist. Die Zellsuspension wird durch eine dünne Kanüle geführt, deren Strahl am Ende durch Vibration in einzelne Tropfen aufgelöst wird. Wenn ein Tropfen eine Zelle enthält, die den markierten Antikörper gebunden hat, wird dieser durch einen Laserstrahl zur Fluoreszenz angeregt. Diese Fluoreszenz kann mit einem Lichtdetektor gemessen und zur Auftrennung der Zellen benutzt werden. Dazu werden die Zellen mittels eines elektrischen Impulses je nach Fluoreszenzintensität aufgeladen und beim Passieren eines elektrischen Feldes entsprechend abgelenkt und sortiert. Die Untersuchung einzelner Zellen auf diese Weise bezeichnet man auch als Durchflußcytometrie oder Flowcytometrie, die entsprechenden Meßgeräte als Durchflußcytometer. Ähnlich der Zellsortierung mittels Oberflächenmolekülen kann dieses Verfahren auch zur Sortierung von fluoreszenzmarkierten Chromosomen genutzt werden, außerdem zur Untersuchung der Bindungsaffinität von Membranrezeptoren (z.B. des LDL-Rezeptors) oder von Hemmstoffen der Zelladhäsion. Immunassays.



FACS

Die mit fluoreszenzmarkierten Antikörpern versehenen Zellen werden angesaugt und in einen sog. Hüllstrahl injiziert, wodurch sie hintereinander geordnet werden. Die Zellen werden einzeln in Tröpfchen verpackt, zur Fluoreszenz angeregt und analysiert. Treffen vorgewählte Kriterien zu, wird das entsprechende Tröpfchen mit einer elektrischen Ladung versehen. Im weiteren Ablauf lenken geladene Platten (Anode und Kathode) die Tröpfchen entsprechend ihrer Ladung ab; nicht geladene Tröpfchen bleiben unbeeinflußt.

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